杜仲水提物上调Nur77表达促进骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化

作者：贺自克; 王上增^*

来源：中国组织工程研究, 2023, 27(15): 2371-2378.

• 骨髓间充质干细胞
• 杜仲
• 水提物
• 成骨分化
• Nur77
• MDM2
• p53
• 通路
• 泛素化

背景：骨髓间充质干细胞作为成骨细胞的前体细胞，探索其分化机制对于预防和治疗骨质疏松症具有重大意义。杜仲能够诱导骨髓间充质干细胞成骨分化，但是杜仲对骨髓间充质干细胞增殖、分化以及Nur77/MDM2/p53通路的影响尚不明确。目的：探究杜仲水提物对骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响并探讨其作用机制。方法：杜仲水提物处理人源和鼠源骨髓间充质干细胞，采用CCK-8法和Annexin V-FITC/PI法分别检测细胞增殖和凋亡情况，Western blot检测增殖、凋亡相关蛋白的表达，Nur77及其下游MDM2、p53相关蛋白的表达及泛素化前后的蛋白水平。成脂、成骨定向诱导分化后，Western blot检测脂肪细胞和成骨细胞的标志蛋白表达来评估其分化程度。转染Nur77 siRNA进入10 mg/mL杜仲水提物处理的骨髓间充质干细胞，检测细胞增殖、凋亡和分化情况。最后，敲低Nur77之后，使用p53抑制剂Pifithrin-α处理骨髓间充质干细胞，检测细胞增殖、凋亡和分化情况以明确其作用机制。结果与结论：（1）杜仲水提物可促进2种骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化，抑制凋亡和成脂分化；（2）杜仲水提物可上调Nur77、MDM2蛋白表达，促进p53蛋白泛素化；敲低Nur77基因则抑制MDM2蛋白表达及p53蛋白泛素化，促进p53蛋白表达，抑制2种骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化；（3）p53抑制剂可逆转Nur77 siRNA的作用，促进2种骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化，抑制凋亡和成脂分化；（4）结果表明，杜仲水提物可以通过Nur77/MDM2/p53途径促进2种骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化，为杜仲在骨相关疾病方面的研究提供理论参考。

• 单位
  河南省中医院