长春新碱降低由转染A20 siRNA促进的弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系增殖

作者:王佳蕊; 王玲玲; 冯江龙; 杨文秀
来源:基础医学与临床, 2017, 37(05): 630-635.
DOI:10.16352/j.issn.1001-6325.2017.05.008

摘要

目的研究A20小分子干扰RNA片段(siRNA)对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞(OCI-LY1)增殖和多药耐药基因(MDR1)表达的影响。方法分对照组、转染组、长春新碱干预组(VCR)组和转染+VCR组。用脂质体转染法将A20 siRNA转入OCI-LY1细胞,MTT法检测细胞对VCR的敏感性;流式细胞计量术检测细胞凋亡;用real-time PCR检测A20及MDR1 mRNA;用Western blot检测细胞内A20、Pgp蛋白及核蛋白NF-κB的表达。结果 1)A20 siRNA转染后,细胞增殖能力增强(P<0.05),VCR刺激后转染细胞的增殖曲线下降缓慢。2)转染细胞凋亡率明显低于对照组,VCR刺激24 h后OCI-LY1细胞凋亡率较加药前明显增加(P<0.05),VCR组凋亡率比转染+VCR组增高的幅度大(P<0.05)。3)转染后,A20 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.001),NF-κB蛋白(P<0.001)、MDR1mRNA(P<0.001)和Pgp(P<0.001)表达都明显增高;但MDR1 mRNA和Pgp在药物刺激后表达降低(P<0.05),且VCR组较转染+VCR组降低的幅度大(P<0.01)。结论 A20 siRNA能有效的增强OCI-LY1细胞内NF-κB的表达,使得MDR1基因及编码蛋白Pgp蛋白增强,从而抑制细胞凋亡、促进细胞增殖;VCR刺激后细胞内MDR1 mRNA和Pgp的表达明显降低,A20 siRNA则减弱了VCR的这一作用。

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