甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌感染猪肺泡巨噬细胞氧化应激的影响

作者：杨裕^*; 关文超; 崔小珍; 贾永鑫; YANG Shiyu

来源：中国畜牧兽医, 2022, 49(02): 480-487.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.02.009

• 甘草查尔酮A
• 副猪嗜血杆菌
• 猪肺泡巨噬细胞
• 氧化应激

【目的】探究甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌感染猪肺泡巨噬细胞引发的氧化应激的影响,为开发治疗副猪嗜血杆菌感染的新型药物提供参考。【方法】利用支气管肺泡灌洗法分离猪肺泡巨噬细胞,分为6组:阴性对照组,未感染副猪嗜血杆菌的猪肺泡巨噬细胞;阳性对照组,感染副猪嗜血杆菌的猪肺泡巨噬细胞;DMSO组,猪肺泡巨噬细胞感染副猪嗜血杆菌后给予0.1%DMSO;5、10和20μg/mL甘草查尔酮A组,猪肺泡巨噬细胞感染副猪嗜血杆菌后给予相应浓度的甘草查尔酮A。各组细胞培养24 h后,用CCK-8法检测细胞活力,用酶标仪或可见光分光光度计检测各组细胞上清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde, MDA)、一氧化氮(nitric oxide, NO)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)水平,用活性氧(reactive oxygen species, ROS)荧光探针(DCFH-DA)检测ROS水平。【结果】与阴性对照组相比,副猪嗜血杆菌感染组猪肺泡巨噬细胞活力均显著降低(P<0.05),上清液中LDH活性均显著提高(P<0.05),MDA、NO、ROS水平及SOD活性均显著增加(P<0.05);与阳性对照组相比,5、10和20μg/mL甘草查尔酮A组猪肺泡巨噬细胞活力均显著提高(P<0.05),上清液LDH活性均显著降低(P<0.05),10和20μg/mL甘草查尔酮A组MDA、NO和ROS水平均显著降低(P<0.05);5、10和20μg/mL甘草查尔酮A处理组GSH-Px、SOD和T-AOC活性均呈剂量依赖性显著升高(P<0.05)。【结论】副猪嗜血杆菌感染猪肺泡巨噬细胞导致氧化和抗氧化平衡失调,5～20μg/mL甘草查尔酮A可以降低细胞氧化应激反应。

• 单位
  山西农业大学