福氏志贺菌IpaC基因-双歧杆菌重组活疫苗的构建与研究

作者：宋彬

来源：中国继续医学教育, 2018, 10(25): 147-149.

• 福氏志贺菌
• 重组疫苗
• 构建
• 质粒
• IpaC
• 双歧杆菌

目的构建重组福氏志贺菌IpaC-双歧杆菌融合基因活疫苗。方法通过PCR法获取福氏志贺菌(2457T)的侵袭性基因IpaC,经连接酶连接到p ET32a从而构建pET32a-ipa C重组表达质粒,用电穿孔法导入双歧杆菌进行表达,用Western Blot鉴定表达的融合蛋白。结果 PCR成功扩增出约31 kbp的IpaC基因,双切酶证实Ipac基因成功连接到pET32a中,并且成功导入双歧杆菌,顺利表达出占细菌蛋白的6.1%左右可溶性融合蛋白,经镍离子柱纯化采用Western Blot分析,结果出现在63 KDa处,说明该蛋白是所要表达的融合蛋白。结论 pET32a-ipaC重组表达质粒导入双歧杆菌后,可以有效表达毒力蛋白IpaC,为下一步研究重组活疫苗在动物体内免疫原性奠定基础。

• 单位
  南阳医学高等专科学校