利用酵母双杂交系统筛选与猪2型链球菌透明质酸酶(HYL)相互作用的蛋白质

作者：吴涛; 常海涛; 谭臣; 付婷; 司有辉; 贝为成; 陈焕春

来源：中国兽医学报, 2009, (09): 1149-1154.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2009.09.025

• 猪链球菌2型
• 透明质酸酶
• 酵母双杂交
• γ内收蛋白
• 装配架离子转运蛋白 Streptococcus suis serotype 2
• hyaluronidase
• yeast two hybrid system
• homo sapiens adducin 3
• assembly ion transporter protein

以猪链球菌2型(SS2)透明质酸酶(HYL)作为诱饵蛋白,利用CytoTrap酵母双杂交系统,从人的肺组织cD-NA文库中筛选与HYL相互作用的蛋白,探索HYL在SS2致病中的作用。首先,通过PCR扩增SS2Hyl全长基因,定向克隆到pSos载体多克隆位点中,构建诱饵载体(pSos-Hyl)。同时,将Hyl克隆到pET-28c载体中,构建重组表达载体(pET28c-Hyl)。将pSos-Hyl和人肺cDNA文库(pMyr-cDNA)共转化cdc25H酵母细胞,筛选与HYL相互作用的阳性克隆。经过筛选和重复验证,并对所得到的载体插入片段进行测序,经BLAST分析,从人肺组织cDNA文库中得到2个...

• 单位
  农业微生物学国家重点实验室; 华中农业大学; 武汉工业学院