miR-497表达抑制对脊髓损伤早期的神经保护作用及其内在机制研究

作者：刘凯; 林勤; 魏桂财; 郑忠; 林向全^*

来源：福建医药杂志, 2023, 45(06): 133-136.

• miR-497
• 脊髓损伤
• PC12细胞
• 线粒体
• 凋亡

目的 探讨微小RNA-497(miR-497)表达抑制对脊髓损伤早期的神经保护作用及其潜在的分子机制。方法 基于前期建立的大鼠PC12细胞诱导神经元氧糖剥夺(OGD)损伤模型，构建miR-497的siRNA干扰表达载体，转染PC12-OGD模型细胞抑制内源性miR-497表达；实验设置OGD组、OGD+siRNA组、OGD+siRNA-NC阴性对照组和空白组；通过CCK-8法检测细胞活性并绘制细胞生长曲线，采用TUNEL间接免疫荧光法检测细胞凋亡情况，经免疫印迹(Western blot)检测线粒体特异性蛋白及凋亡通路相关蛋白的表达。结果 含序列C的RNA干扰表达载体可明显降低PC12-OGD模型细胞内源性miR-497的表达；miR-497敲减能明显增强PC12-OGD细胞的活性，促进细胞生长增殖：OGD+siRNA组24 h细胞存活率达78.19%,明显高于OGD组(53.60%)和OGD+siRNA-NC组(52.80%);TUNEL免疫荧光实验显示OGD+siRNA组凋亡细胞数少于OGD+siRNA-NC和OGD组；免疫印迹显示OGD+siRNA组较相应对照组线粒体特异性蛋白TOMM20表达上调，同时Bcl-2表达上调，Bax、cleavesd-caspase-3、cleavesd-caspase-9表达下调，cleavesd-caspase-3/caspase-3和cleavesd-caspase-9/caspase-9相对表达比值减低(P均<0.05)。结论 PC12-OGD细胞中抑制miR-497可改善线粒体功能，减少细胞凋亡，主要通过上调Bcl-2、下调Bax和减少caspase-3/caspase-9激活起到保护脊髓损伤后的脊髓神经元的作用。

• 单位
  福州市第二医院