多肽301LARSLKT307对斑马鱼胚胎早期心脏发育的影响

作者:胡银; 刘恒; 严湘芸; 庄斌; 陈文娟; 王星云; 韩树萍; 余章斌*
来源:安徽医科大学学报, 2019, 54(05): 678-684.
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.05.003

摘要

目的探究踝蛋白-1(TALIN-1)来源的多肽301LARSLKT307对斑马鱼胚胎心脏发育的影响。方法①利用Pubmed、Uniprot和ProtParam tool在线生物信息学分析网站,对多肽301LARSLKT307的保守性、理化特性和其前体蛋白进行分析;②在斑马鱼胚胎1细胞期,镜下显微注射多肽301LARSLKT307后,计数36、48及72 h斑马鱼的心率并观察对斑马鱼心包发育的影响;③利用在心脏房室特异表达的基因探针cmlc2、amhc及vmhc原位杂交技术显色后检测心脏的形态;④利用实时定量PCR(qPCR)检测斑马鱼心脏发育相关基因amhc、vmhc、mef2c和nkx2.5的表达变化。结果①多肽301LARSLKT307是位于其前体蛋白TALIN-1的B41结构域的亲脂性肽;②实验多肽注射组的斑马鱼胚胎的心率在36、48及72 h均出现降低(P<0.05),且心包出现明显水肿;③实验多肽注射组斑马鱼胚胎48 h环化未能完成,对照肽注射组及野生型组环化正常;④qPCR检测显示,实验多肽注射组的斑马鱼心脏发育相关基因amhc、vmhc、mef2c、nkx2.5较野生型组均有不同程度下降。结论多肽301LARSLKT307可影响斑马鱼胚胎期心脏的发育及功能。

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