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摘要
目的:研究葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导体外溃疡性结肠炎的细胞损伤及细胞焦亡的机制。方法:取Caco-2细胞、NCM460细胞，用不同质量浓度(0、10、20、30、40、50、60、70 mg/mL)DSS处理0、24、48 h,通过CCK-8分别筛选两种细胞的IC50质量浓度，建立DSS诱导的体外溃疡性结肠炎细胞损伤模型；设置对照组、24 h组(DSS干预24 h)和48 h组(DSS干预48 h),倒置显微镜观察细胞膜完整性，流式细胞术分析细胞活力，蛋白免疫印迹检测细胞焦亡相关蛋白GSDMD和GSDME的表达水平。结果:CCK-8实验结果表明：DSS对Caco-2细胞、NCM460细胞的IC50质量浓度分别为10、40 mg/mL,分别以此质量浓度构建体外溃疡性结肠炎细胞损伤模型；与对照组相比，24 h组和48 h组的细胞膜完整性被破坏，细胞凋亡增加(P<0.05),活化的GSDMD-N、GSDME-N蛋白表达增加(P<0.05),而GSDMD-Full、GSDME-Full表达减少(P<0.05)。结论:DSS可诱导体外溃疡性结肠炎细胞发生损伤，损伤的肠上皮细胞中可发现细胞焦亡现象。
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