牛MMP9启动子与转录因子NF-κB作用的研究

作者:苏晨; 毛永尽; 杨慧琳; 曲波; 赵锋; 崔英俊*
来源:中国乳品工业, 2021, 49(12): 4-7.
DOI:10.19827/j.issn1001-2230.2021.12.001

摘要

为确认转录因子NF-κB对牛MMP9启动子的影响,利用P65过表达载体转染牛乳腺上皮细胞,检测其在蛋白水平对MMP9表达的影响;然后构建牛MMP9启动子双荧光素酶报告载体,转染Hela细胞后用双荧光素酶实验检测启动子活性,确定MMP9基因核心启动子区域,同时添加NF-κB抑制剂(Celastrol)确认P65对启动子活性的影响。结果为P65过表达能显著提高牛乳腺上皮细胞中的p-P65、P65和MMP9的蛋白表达;牛MMP9基因启动子上转录因子NF-κB结合位点在-420~-80 bp区域;NF-κB抑制剂显著降低牛MMP9基因启动子活性。因此转录因子NF-κB可直接靶向牛MMP9基因启动子区域并促进MMP9基因表达。