氨基末端定点聚乙二醇化尿酸酶的研究

作者：李盈淳; 朱姝; 高向东; 才蕾; 姚文兵

来源：药物生物技术, 2009, 16(06): 508-511.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.2009.06.004

• 尿酸酶
• 氨基末端
• 定点PEG化修饰
• 分离纯化
• 免疫原性

制备氨基末端定点PEG修饰的尿酸酶,并比较尿酸酶修饰前后的免疫原性差异。采用M_r 20k的mPEG-丙醛选择性修饰尿酸酶的氨基末端;利用source 30Q离子交换层析和sephacryl S-200分子排阻层析分离纯化修饰后尿酸酶;测定修饰前后尿酸酶的酶动力学参数和免疫原性。尿酸酶和N端PEG修饰尿酸酶的SDSPAGE检测显示单一条带,SE-HPLC测定尿酸酶修饰前后的保留时间分别为26.578 min和23.818 min;PEG修饰后尿酸酶的最大反应速度为尿酸酶的80%;PEG修饰后尿酸酶与抗体的结合能力和体内的免疫原性均明显降低。这种方法可用来制备N端PEG定点修饰尿酸酶,修饰后可明显降低尿酸酶的免疫原性。

• 单位
  中国药科大学