骨髓间充质干细胞胰系方向诱导分化的成瘤性及致瘤性

作者：姜达琳; 刘国旺; 孙琢玉; 王心^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(01).

• 骨髓间充质干细胞
• 胰系细胞
• 成瘤性
• 致瘤性

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外诱导分化为胰系细胞过程中的潜在成瘤性以及体内移植后的潜在致瘤性。方法选取雄性SD大鼠(购自中科院上海动物实验中心), 分离大鼠BMSCs进行体外培养及传代, 选取生长良好的第2代细胞进行诱导, 检测胰腺特征性蛋白的表达, 同时检测端粒酶活性, c-myc和p16基因的表达;随后将经或未经诱导的第2代BMSCs制成单细胞悬液, 调整浓度至3.0×1010/L, 采用随机数字法将SD大鼠分为3组, 每组30只, 分别为:BMSCs细胞组(注射未经诱导的BMSC细胞悬液0.2 ml), 诱导BMSC细胞组(注射诱导后的BMSC细胞悬液0.2 ml), 空白对照组(注射等量含胎牛血清的DMEM/F12培养液0.2 ml), 6个月后留取活检组织, 检测端粒酶活性, c-myc和p16基因的表达。多组间比较采用单因素方差分析, 两组数据间比较采用t检验。结果诱导后可见胰腺特征性蛋白α-淀粉酶、细胞因子-7、C-肽、胎肝激酶-1的表达。随着BMSCs在体外传代、诱导分化及体内移植, 端粒酶以及c-myc基因活性逐渐降低, 体内移植后, BMSCs细胞组端粒酶活性低于空白对照组(0.45±0.12比1.32±0.41, P<0.05), 诱导BMSCs细胞组端粒酶活性低于空白对照组(0.13±0.04比1.32±0.41, P<0.05), 诱导BMSCs细胞组端粒酶活性低于BMSCs细胞组(0.13±0.04比1.32±0.41, P<0.05);同样, 体内移植后, BMSCs细胞组c-myc活性低于空白对照组(3.26±1.33比5.85±1.42, P<0.05), 诱导BMSCs细胞组c-myc活性低于空白对照组(1.42±1.15比5.85±1.42, P<0.05), 而诱导BMSCs细胞组c-myc活性低于BMSCs细胞组(1.42±1.15比3.26±1.33, P<0.05);p16在各阶段基因功能正常, 无突变及缺失。结论 BMSCs在体外培养生长状态良好, 细胞纯度高, 可定向诱导能分化为胰系细胞, 体外无成瘤性, 植入动物体内后无致瘤性。

• 单位
  公共卫生学院; 天津市第二人民医院; 天津医科大学; 天津市第四中心医院