TRPC6对TGF-β1诱导体外足细胞损伤的作用

作者：黄海庭; 林栩; 尤燕舞; 汤春荣; 古贤君; 黄美英; 谭军华; 覃幼玲; 黄非凡

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2017, 37(05): 340-346.

• 足细胞
• 转化生长因子-β1
• 凋亡
• 结蛋白
• Nephrin
• Caspase 9

目的探讨瞬时受体电位C6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)对TGF-β1干预下足细胞nephrin、desmin、caspase 9蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法体外培养小鼠肾足细胞分为4组:正常对照组、TGF-β1干预组、TGF-β1+PGPU6/GFP/Neo-TRPC6-mus-581组(TRPC6低表达组)和TGF-β1+PGPU6/GFP/Neo-NC组(空载体组),干预48 h后用Western blot和real-time PCR检测nephrin、desmin、caspase 9蛋白和mRNA表达水平,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DAPI染色观察凋亡细胞核形态学变化。结果转染48 h时足细胞表达绿色荧光蛋白较24 h时明显增强,TRPC6低表达组TRPC6蛋白水平较正常对照组明显下降(P<0.05),空载体组TRPC6蛋白表达水平无明显变化;TGF-β1干预48 h后desmin、caspase 9蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.01),nephrin蛋白和mRNA表达水平明显下降(P<0.05),敲低TRPC6表达上述变化不明显;TGF-β1干预组足细胞凋亡率为(14.0±2.1)%,TRPC6低表达组凋亡率为(10.90±0.56)%(P<0.05),空载体组细胞凋亡率无明显差异;TGF-β1干预后足细胞凋亡增多并出现典型凋亡细胞核形态学改变。结论TGF-β1能诱导足细胞凋亡、减少nephrin表达、增加desmin和caspase 9表达,其机制可能与上调TRPC6表达密切相关,敲低TRPC6表达能逆转上述变化,对足细胞具有保护作用。

• 单位
  右江民族医学院附属医院