NO诱导富含miR-126的胎盘间充质干细胞外泌体治疗大鼠脓毒症

作者：张国虎; 李友军; 夏金明; 吕世进; 王锦权^*

来源：安徽医科大学学报, 2019, 54(06): 918-925.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.06.017

• 脓毒症
• 微小核糖核酸-126
• 外泌体
• 高迁移率族蛋白B1

目的探索NO诱导的胎盘间充质干细胞(PMSCs)外泌体对脓毒症大鼠的治疗效果及药理机制。方法分别利用NO、miR-126抑制剂、无效对照抑制剂对PMSCs进行诱导培养,超速离心获取3种外泌体(N-Exo、I-Exo和Exo)。利用透射电镜观察外泌体形态,qPCR检测miR-126含量。取清洁级SD大鼠160只,等分成4组。对照组(假手术+PBS)、脓毒症组(CLP+PBS)、N-Exo组(CLP+N-Exo)、I-Exo组(CLP+I-Exo)。利用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建大鼠脓毒症模型。检测各组大鼠术后48 h血生化指标(血清ALT、AST、BUN、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ、IL-1β含量);取肺和肾,HE染色进行病理评分、测量血管微渗漏指数和干/湿重之比;Western blot检测肾脏内高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)、Toll样受体2(TRL-2)、TRL-4、p-p65蛋白含量、qPCR测量miR-126-3p和miR-126-5p的含量;最终观察各组大鼠7 d存活率。结果①miR-126含量:N-Exo>Exo>I-Exo(P<0.05);②7 d存活率:脓毒症组和I-Exo组显著低于N-Exo组和对照组(P<0.05);③肝肾功能及炎症因子含量、肺和肾病理评分、血管微渗漏及干/湿重之比:脓毒症组和I-Exo组显著高于N-Exo组和对照组(P<0.05);④肾脏内miR-126-3p、miR-126-5p及HMGB1、RAGE、TRL-2、TRL-4、p-p65蛋白含量:脓毒症组和I-Exo组显著低于N-Exo组和对照组(P<0.05)。结论 N-Exo可能是通过miR-126-HMGB1-NF-κB来抑制炎症反应,保护血管内皮细胞,最终提高脓毒症大鼠的生存率。

• 单位
  杭州师范大学; 安徽医科大学