P53凋亡刺激蛋白2促进肝细胞脂质蓄积的分子机制研究

作者：车阳; 王晋明; 王阳; 石英^*

来源：北京医学, 2022, 44(01): 49-53.

DOI：10.15932/j.0253-9713.2022.01.011

• P53凋亡刺激蛋白2
• 代谢相关脂肪性肝病
• CYP4A

目的 研究P53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein of P53-2, ASPP2)在代谢相关脂肪性肝病（metabolic associated fatty liver disease, MAFLD）中对肝细胞脂质蓄积的分子机制。方法 利用ASPP2单倍体敲除小鼠（ASPP2+/-）和对照小鼠（ASPP2+/+）进行转录组差异分析，筛选差异表达基因（differentially expressed genes, DEGs），利用京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG）数据库对DEGs进行富集和功能注释，基于相邻基因重复实例的搜索工具（search tool for recurring instances of neighbouring genes, STRING）数据库及Cytoscape软件分析相互作用关键基因。体外实验，培养正常小鼠肝细胞AML 12细胞系和人正常肝细胞系7702，分别在ASPP2过表达及敲除状态下构建MAFLD细胞模型。采用油红染色观察脂质蓄积情况，采用反转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR）分析mRNA差异表达情况。结果 共筛选出285个DEGs，包括147个上调基因和138个下调基因。基因本体（gene ontology, GO）功能富集显示，DEGs显著富集在脂质代谢过程、CYP450途径、脂质贮存调控和脂质生物合成过程负调控等；KEGG通路富集显示，DEGs显著富集在花生四烯酸代谢、PPAR信号通路和TRP通道的炎症介质调节等。蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction, PPI）网络筛选出CYP4A 15个关键基因。体外结果显示，ASPP2过表达时脂质蓄积加重，CYP4A及炎症因子mRNA增加（P<0.001）;ASPP2敲除时，CYP4A及炎症因子mRNA减少（P<0.01）。结论 ASPP2可促进肝细胞脂质蓄积，从而加快MAFLD的进展。

• 单位
  首都医科大学附属北京佑安医院; 北京市肝病研究所