摘要

目的检测微小RNA-499-5p(miR-499-5p)在骨肉瘤组织中的表达及其对骨肉瘤细胞增殖能力的影响,并探讨其调节机制。方法实时定量聚合酶链反应(PCR)法用来检测骨肉瘤组织、瘤旁组织及骨肉瘤细胞株中miR-499-5p的表达量。细胞计数试剂盒(CCK-8)法及Western blot分别用来研究miR-499-5p对骨肉瘤细胞增殖能力的影响及探讨miR-499-5p调节骨肉瘤细胞增殖的相关机制。结果在骨肉瘤组织中,miR499-5p表达量显著升高(肉瘤旁组织中表达量为0.34±0.09,而骨肉瘤组织中的表达量为1.47±0.18,P=0.008);此外,miR-499-5p在骨肉瘤细胞株HoS、MG-63及Hu09中的水平(分别为1.65±0.03、1.13±0.11、1.87±0.14)显著高于其在人骨髓间充质干细胞hMSCs中的水平(0.56±0.19,P=0.005);CCK-8实验结果表明,与空白及阴性对照组比较,在转染miR-499-5p mimics后48、72、96 h,MG-63细胞的增殖能力明显增强(P=0.030);流式细胞术检测细胞凋亡的结果表明,过表达miR-499-5p组内MG-63细胞的凋亡率为(0.87±0.19)%,显著低于空白组及阴性对照组内细胞的凋亡率[分别为(5.49±0.53)%、(6.72±0.85)%,P=0.030];此外,我们通过靶基因预测软件、结合RT-qPCT及Western blot结果初步认为miR-499-5p可通过转录后调节程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达而发挥上述促癌效应。结论miR-499-5p在骨肉瘤组织中高表达且其在体外可促进骨肉瘤细胞的增殖。

  • 单位
    新疆医科大学第六附属医院