金黄色葡萄球菌肠毒素C3单克隆抗体的制备与鉴定

作者：王敏; 马瑞玉; 李先平; 郑荣; 张婷婷; 曹虹

来源：中国微生态学杂志, 2014, 26(02): 134-138.

DOI：10.13381/j.cnki.cjm.201402003

• 金黄色葡萄球菌
• SEC3
• 单克隆抗体
• 间接ELISA

目的制备稳定分泌抗金黄色葡萄球菌肠毒素C3(SEC3)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对单克隆抗体的性质进行鉴定。方法以SEC3重组蛋白免疫Balb/c小鼠,应用细胞融合技术将小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA法检测筛选及2次有限稀释法克隆化培养,获得目的杂交瘤细胞株,并对其所产生的单克隆抗体进行效价、亲和常数及抗原识别表位等相关性质的鉴定。结果最终获得了两株能分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞1C12和2A2,两者细胞培养上清的效价分别为1∶3 200和1∶1 600。经分析可知1C12细胞株的亲和力高于2A2细胞株,同时相加实验表明两个单克隆抗体识别抗原表位相同。结论单克隆抗体制备成功,为进一步完善肠毒素SEC3的临床检测奠定了基础。

• 单位
  中南大学湘雅医学院