人肿瘤MUC1/Y基因真核表达载体的构建及在BIU-87细胞中的表达

作者：罗刚; 周四维; 鲁雄兵; 宋晓东; 孙凯; 曹正国; 叶章群

来源：武汉大学学报(医学版), 2005, 20(02): 186-189+132.

DOI：10.3969/j.issn.1001-1420.2005.09.024

• MUC1/Y
• 克隆
• 绿色荧光蛋白
• 真核表达

目的:克隆人肿瘤MUC1/Y全长基因及构建真核表达载体 pEGFP MUC1/Y并观察 pEGFP MUC1/Y在 BIU 87细胞中表达以用于进一步生物学功能及肿瘤生物学治疗的研究。方法: 取新鲜膀胱肿瘤组织提取总RNA,采用随机引物进行反转录,将特异引物扩增的MUC1/Y全长 PCR产物克隆至真核表达载体 pEGFP C1,测序鉴定后命名为 pEGFP MUC1/Y,用脂质体转染膀胱肿瘤细胞BIU 87,以 Western Blot检测其表达情况。结果:酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含人MUC1/Y全长cDNA编码序列, Western Blot检测和转染实验,表明构建的 pEGFP MUC1/Y基因在BIU 87真核细胞中表达,其绿色荧光蛋白瞬时表达率为 20%。结论:人肿瘤 MUC1/Y全长cDNA基因克隆及其真核表达载体 pEGFP MUC1/Y 构建成功,可用于肿瘤生物学治疗的研究。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院