摘要
目的 探究miR-328-5p通过调节自噬影响乳腺癌细胞对紫杉醇(Taxol)化疗敏感性的作用机制。方法 选取乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,根据目的不同分为miR-NC组(转染阴性对照)、miR-328-5p组(转染miR-328-5p mimics)、miR-NC+Taxol组和miR-328-5p+Taxol组,以及si-NC组(转染阴性对照)、si-整合素α5(ITGA5)组(转染si-ITGA5)、si-NC+Taxol组和si-ITGA5+Taxol组。采用qRT-PCR检测ITGA5 mRNA的表达水平,分别采用CCK-8实验、流式细胞术检测Taxol对各组乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制率及凋亡情况,采用Western Blot方法检测各组ITGA5、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)及p62蛋白的相对含量。结果 miR-328-5p组miR-328-5p相对表达量较miR-NC组提高(P<0.01)。miR-328-5p组、miR-NC+Taxol组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ值低于miR-NC组,p62蛋白含量高于miR-NC组,且miR-328-5p+Taxol组上述指标低于或高于miR-328-5p组、miR-NC+Taxol组(P<0.05)。miR-328-5p组、miR-NC+Taxol组ITGA5 mRNA及蛋白表达均低于miR-NC组,且miR-328-5p+Taxol组低于miR-NC+Taxol组和miR-328-5p组(P<0.05)。si-ITGA5组、si-NC+Taxol组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ值低于si-NC组,而p62蛋白含量高于si-NC组,且si-ITGA5+Taxol组上述指标低于或高于si-ITGA5组、si-NC+Taxol组(P<0.05)。不同Taxol浓度时,si-ITGA5+Taxol组细胞增殖抑制率及凋亡率均高于si-NC+Taxol组(P<0.05)。结论 miR-328-5p可增强乳腺癌MCF-7细胞对Taxol的化疗敏感性,作用机制可能与miR-328-5p通过抑制ITGA5表达从而抑制细胞自噬相关。
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单位秦皇岛市第四医院