摘要
目的 通过实验探讨慢病毒转染调控FoxM1表达对人肝内胆管细胞癌(ICC)增殖、侵袭能力及基质金属蛋白酶(MMP)-9和MMP-2表达的影响。方法 Western blot检测ICC细胞株HCCC-9810、RBE及SSP-25的FoxM1蛋白表达水平,选取表达量较低者作为上调FoxM1细胞株,较高者作为下调细胞株;将分别携带FoxM1质粒和shRNA的慢病毒载体转染目标上调和下调ICC细胞株,建立稳定上下调FoxM1的细胞株(Western blot验证);MTT法检测转染后细胞增殖力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;qPCR检测各组稳定转染细胞株MMP-9及MMP-2mRNA表达水平。结果 SSP-25的FoxM1蛋白表达最高,HCCC-9810最低,由此选取SSP-25作为下调FoxM1表达目标细胞株,HCCC-9810作为上调FoxM1表达目标细胞株。慢病毒转染成功构建稳定上调(HCCC-9810-FoxM1组)及下调FoxM1细胞株(SSP-25-shFoxM1组);HCCC-9810-FoxM1组增殖及侵袭能力明显高于HCCC-9810-Control组(均P<0.05),而SSP-25-shFoxM1组增殖及侵袭能力较SSP-25-Control组明显下降(均P<0.05);HCCC-9810-FoxM1组中MMP-9及MMP-2 mRNA表达较HCCC-9810-Control组明显升高,而SSP-25-shFoxM1组中MMP-9及MMP-2 mRNA表达较SSP-25-Control组明显降低(均P<0.01)。结论 FoxM1促进ICC细胞增殖及侵袭,可能调控MMP-9及MMP-2表达,也有可能作为ICC潜在的生物标志物。
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单位分子医学重点实验室; 桂林医学院附属医院; 桂林医学院