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摘要
目的 观察熊果苷（AR）对糖尿病心肌病（DCM）小鼠心肌损伤的影响，探讨其心肌保护作用是否与沉默信息调节因子1(SIRT1)有关。方法 将60只雄性C57BL/6小鼠随机均分为Con组、DCM组、DCM+AR组、DCM+AR+EX527组，每组15只。除Con组外均采用腹腔注射链脲佐菌素联合高糖高脂饮食法建立DCM小鼠模型，DCM+AR组和DCM+AR+EX527组建模成功后给予AR 50 mg/（kg·d）灌胃12周，同时DCM+AR+EX527组建模后即给予SIRT1特异性抑制剂EX527 20 mg/kg腹腔注射，1周/次，共注射11次。各组小鼠进行心脏超声检查，计算左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短率（LVFS）；处死后观察心肌组织纤维化程度和胶原沉积情况，比较各组心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及活性氧（ROS）表达，免疫荧光染色观察心肌组织NF-κB表达，ELISA法检测SIRT1去乙酰化活性，实时荧光定量PCR法检测Collagen1、Collagen3、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA表达，Western blotting法检测SIRT1及细胞焦亡相关因子NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)和裂解的半胱氨酸蛋白酶1(cleaved Caspase-1)蛋白表达。结果 Con组心肌组织无明显蓝色胶原纤维及红色胶原着色，即无显著纤维化及胶原沉积；与Con组相比，DCM+AR组、DCM组、DCM+AR+EX527组小鼠均存在心肌组织纤维化程度增加、胶原沉积增多，以DCM组、DCM+AR+EX527组变化更明显。与Con组比较，DCM+AR组、DCM组、DCM+AR+EX527组小鼠LVEF、LVFS及心肌组织SIRT1去乙酰化活性、SOD表达均降低，NF-κB、MDA、ROS及IL-6、TNF-α、Collagen1、Collagen3、NOX2、NOX4 mRNA相对表达量均升高，以DCM组、DCM+AR+EX527组变化更明显（P均<0.05）。与Con组和DCM+AR组比较，DCM组和DCM+AR+EX527组小鼠SIRT1蛋白相对表达量降低，NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18、cleaved Caspase-1蛋白相对表达量均升高（P均<0.05）。结论 AR可通过减轻心肌组织氧化应激损伤和炎症反应，进而抑制炎症小体形成和心肌细胞焦亡，最终减轻DCM小鼠的心肌损伤，其机制可能与激活SIRT1信号通路有关。
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