一种高效快速肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗纯化方法的建立

作者：刘荣凤; 寇佳琳; 黄前荣; 张永强; 任新刚; 李红臣

来源：中国生物制品学杂志, 2017, 30(07): 764-768.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.001809

• 肺炎球菌多糖
• 载体蛋白
• 结合疫苗
• 纯化
• 免疫原性

目的建立一种高效快速肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗CPS9V-CRM197的纯化方法。方法将9V型肺炎球菌多糖(CPS9V)与载体蛋白(CRM197)通过胺还原法进行偶连结合,制备成多糖蛋白结合物CPS9V-CRM197。通过超滤及阴离子层析两步法纯化后,经皮下免疫BALB/c小鼠,5μg/只,首次免疫后14d进行第2次免疫。于末次免疫后0、7、14、21d经颈动脉采血,分离血清,ELISA法检测血清中的IgG及IgM抗体滴度。结果纯化的CPS9V-CRM197结合物纯度达100%,多糖的总回收率为95%,分子半径为8.4nm,CL-4B色谱洗脱体积为50.32ml,酶解敏感性高于载体蛋白CRM197。末次免疫后7、14、21d时,CPS9V-CRM197免疫小鼠血清中IgG及IgM的滴度均明显高于CPS9V组(P<0.05)。结论本实验建立的肺炎多糖结合物两步纯化法具有高效、快速等优点,可用于进一步提高实际工业化生产中的生产效率。

• 单位
  河北佑仁生物科技有限公司; 河北医科大学第四医院