摘要
为高效地分离闽楠内生真菌,以福建成熟闽楠林下自生闽楠苗木为研究对象,利用高通量培养法获得闽楠内生真菌并研究其生物多样性,研究不同稀释比例对内生真菌分离的影响并筛选最佳分离浓度。结果共获得656株内生真菌,经内转录间隔区(ITS)序列分析,鉴定为35种和12个未知种,未知种比例达25.53%。其中,黑腐皮壳科未知种(Valsaceae sp.,代表菌株P28)为分离频率最高的内生真菌,分离频率为12.04%。闽楠根、茎和叶片内生真菌辛普森指数均超过0.80,说明闽楠内生真菌多样性高;根部内生真菌多样性最高(香农指数2.304),其次为茎(香农指数2.234),最低的为叶(香农指数2.128)。有9种内生真菌的ITS序列相似度低于97%,共147株,占全部内生真菌株数的22.41%。从不同稀释比例的组织悬浮液中获得的内生真菌的数量和种类均存在差异,未经稀释的原液中分离出的内生真菌数量和种类均是最多的,共获得265株36种,分离种类占分离数量的13.58%;稀释16倍的组织悬浮液中分离出的内生真菌总数最少,共获得64株15种,但是分离种类占分离数量的23.44%。在一定范围内,随着稀释比例的增大,高通量培养法单位分离数量获得的种类增加。
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