表达绿色荧光蛋白的重组人偏肺病毒的构建及其中和抗体检测方法的应用

作者：李晓艳; 葛金英; 哈斯苏荣; 王琪; 焦丽红; 王永; 步志高

来源：中国预防兽医学报, 2011, (09): 665-670.

• 人偏肺病毒
• 反向遗传技术
• 病毒拯救
• 绿色荧光蛋白 human metapneumovirus
• reverse genetics technique
• rescue of virus
• EGFP

人偏肺病毒(hMPV)是最新发现的与呼吸道疾病有关的病原体。为构建表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的B型重组hMPV,本研究利用反向遗传学技术,以表达EGFP的hMPV NL/1/99株全长cDNA质粒重组pPS-hMPV-EGFP,及其4种辅助重组质粒pCITE-N、pCITE-P、pCITE-L、pCITE-M2.1为基础,共转染BHK-21细胞进行重组病毒的拯救。鉴定结果表明拯救的重组病毒rhMPV-NL-EGFP高效表达外源基因EGFP。rhMPV-NL-EGFP与亲本病毒株具有相似的生物学特性,生长滴度可达106.7 TCID50/mL。rhMPV-NL-EGFP在细胞中连续传代1...

• 单位
  农业部; 公共卫生学院; 内蒙古农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室; 哈尔滨医科大学