晚期糖基化终末产物对大鼠雪旺细胞增殖和凋亡影响的体外研究

作者：罗娜; 王琦; 杨文强; 于炎冰; 张黎^*

来源：临床神经外科杂志, 2021, 18(01): 41-52.

• 晚期糖基化终末产物
• 大鼠
• 雪旺细胞
• 增殖
• 凋亡
• 体外
• 糖尿病周围神经病

目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对大鼠雪旺细胞(RSC-96)增殖和凋亡的影响及其机制。方法 (1)体外培养RSC-96细胞(大鼠源性雪旺细胞系),细胞培养24 h后用AGEs处理RSC-96细胞造模;(2)细胞增殖实验:细胞培养24 h后,用0、100、250、500、1 000μg/m L浓度的AGEs处理细胞24 h、48 h、72 h,之后用CCK-8试剂盒检测各组细胞在450 nm处的吸光值;(3) Caspase-3活性测定:细胞培养24 h后,用0、100、500μg/m L浓度AGEs处理细胞48 h,用Caspase-3活性检测试剂盒检测各组细胞在405 nm处的吸光值;(4)细胞凋亡检测:AGEs处理细胞72 h后进行TUNEL染色,显微镜下观察染色阳性细胞数;(5)蛋白表达检测:AGEs处理细胞72 h后,用Western Blot法检测细胞的p-Akt、Akt、p-GSK3β、GSK3β、Bcl-2、BAD、CHOP、GRP78蛋白表达水平。结果 (1)各浓度AGEs组细胞的活力(培养72 h时)明显降低,Caspase-3活性明显增强,凋亡指数明显增高(均P <0.05);(2) AGEs组细胞的p-Akt、p-GSK3β、Bcl-2和GRP78蛋白表达水平降低,BAD、CHOP蛋白表达水平升高。结论 AGEs能抑制大鼠雪旺细胞的增殖;并通过增强Caspase-3活性,抑制Akt的激活,增强内质网应激导致细胞的凋亡。

• 单位
  中日友好医院; 北京大学