新型示踪MHC-I类分子方法的建立

作者：李志海; 邹丽云; 熊锐华; 张晋宇; 李景怡; 谢谆怡; 秦瑶; 李青; 赵奇; 万瑛; 林治华

来源：免疫学杂志, 2010, (09): 809-812.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20100191

• 绿色荧光蛋白
• MHC-I类分子
• Tetracysteine tag
• Halotag Green fluorescent proteins
• MHC class I
• Tetracysteine tag
• Halotag

目的采用位点特异性荧光蛋白标记技术建立新型示踪MHC-I类分子的方法,比较TCtag和halotag在体细胞和抗原递呈细胞中示踪MHC-I类分子的优缺点。方法构建H-2Kb-TCtag和H-2Kb-halotag融合蛋白的真核慢病毒表达载体,转染293FT细胞制备病毒,将病毒分别感染体细胞293FT和树突状细胞系DC2.4细胞后,TCtag采用染料ReAsH和FlAsH染色,Halotag采用染料HaloTagTMR染色,在激光共聚焦显微镜下观察H-2Kb的分布情况。结果通过激光共聚焦显微镜观察发现:TCtag与染料ReAsH和FlAsH只在293FT细胞内是特异性的结合;Halotag与用...

• 单位
  重庆理工大学; 中国人民解放军陆军军医大学