摘要

目的:通过观察益气活血法对萎缩性胃炎癌前病变(PLGC)模型小鼠miR216b-Beclin1通路的影响,探讨其干预PLGC的自噬作用机制。方法:将75只健康雄性SPF级KM小鼠随机分为空白组和造模组,造模组小鼠每日采用MNNG溶液(150μg·mL~(-1))自由饮用及灌胃,同时每日灌胃雷尼替丁溶液(0.03g·kg~(-1)),造模12周。按照随机对照表将造模小鼠分为模型组、益气组(黄芪 3.5g·kg~(-1))、活血组(三七粉 0.7g·kg~(-1))、益气活血组(黄芪 3.5g·kg~(-1) +三七粉 0.7g·kg~(-1))及叶酸组(2mg·kg~(-1))。予相应药物灌胃8周后取材,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠胃黏膜病理改变,蛋白免疫印迹法(Western Blot) 检测胃组织微管相关蛋白轻链3(LC3I、LC3II)、自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组胃黏膜Beclin1及miR-216b的基因表达情况。结果:与正常组比较,病理学观察显示模型组胃黏膜固有腺体减少,出现萎缩伴肠上皮化生,各治疗组均有改善,其中益气活血组改善最为明显。与模型组比较,各治疗组胃组织LC3I、LC3II、LC3II/LC3I及Beclin1蛋白含量均有升高(P<0.05,P<0.01),其中益气活血组升高最为明显。基因表达方面,与模型组比较,各治疗组小鼠Beclin1表达升高(P<0.05),miR216b表达下降(P<0.05),尤以益气活血组最为明显。结论:以黄芪、三七为代表的益气活血法治疗PLGC的作用机制可能为通过抑制miR216b的表达,激活Beclin1,从而促进自噬,发挥修复胃黏膜的作用。