微小RNA-31-5p调控蛋白激酶Cε通路在远程缺血预处理保护兔脊髓缺血再灌注损伤中的作用机制

作者：秦洋; 倪锦萍; 康利; 仲志栋; 王立仁; 尹述洲^*

来源：实用临床医药杂志, 2022, 26(02): 11-17.

• 微小RNA-31-5p
• 远程缺血预处理
• 脊髓缺血再灌注损伤
• 蛋白激酶Cε
• 脑源性神经营养因子

目的 探讨微小RNA-31-5p(miR-31-5p)在远程缺血预处理(RIPC)保护兔脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)中的作用及其机制。方法 将60只日本大耳白兔分为假手术(sham)组、缺血再灌注(I/R)组、RIPC组、RIPC+miR-NC组、RIPC+miR-31-5p mimic组，每组12只。采用夹闭腹主动脉30 min建立SCIRI模型，通过鞘内注射miR-31-5p mimic质粒构建miR-31-5p过表达模型，除sham组和I/R组外，其余各组于闭腹主动脉前1 h实施RIPC。再灌注48 h后，对动物进行后肢运动功能评分和血-脊髓屏障(BSCB)通透性检测；苏木精-伊红(HE)染色观察脊髓组织形态学变化；TUNEL检测脊髓组织神经元凋亡情况；逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测脊髓组织miR-31-5p和蛋白激酶Cε(PKCε)和脑源性神经营养因子(BDNF)的mRNA表达；Western Blot检测脊髓组织PKCε、BDNF蛋白表达。结果 与sham组相比，I/R组后肢运动功能评分降低，伊文思蓝(EB)含量、神经元凋亡率增加，差异有统计学意义(P<0.05),且脊髓神经元数量减少，空泡化明显，胞核固缩；与I/R组相比，RIPC组后肢运动功能评分、PKCε和BDNF的mRNA和蛋白表达增加，EB含量、神经元凋亡率、miR-31-5p表达降低，差异有统计学意义(P<0.05),且正常神经元明显增多，少数细胞空泡变性，核仁明显；使用miR-31-5p mimic上调miR-31-5p的表达可显著减弱RIPC对兔SCIRI的保护作用(P<0.05)。结论 miR-31-5p的表达在RIPC后降低，并可通过激活PKCε蛋白，上调脊髓组织中BDNF的表达，减轻SCIRI。

• 单位
  上海交通大学; 苏州九龙医院