人冠状病毒HKU1血清学检测方法的建立及其初步应用

作者:周为民; 王文玲; 谭文杰; 张陵林; 殷霄; 陆柔剑; 王慧娟
来源:中华实验和临床病毒学杂志, 2010, (05): 376-379.

摘要

目的表达HCoV-HKU1的壳蛋白(N蛋白)及棘突蛋白(S蛋白),建立检测血清中相应抗体的方法。方法使用原核表达系统表达纯化HCoV-HKU1的N蛋白,转膜制条建立基于蛋白印迹的N抗体检测方法。构建HCoV-HKU1S蛋白的真核表达质粒,转染细胞后,用间接免疫荧光(IFA)建立S抗体检测方法。利用已建立的N抗体和S抗体检测方法,检测了100份正常成人血清。结果经WesternBlot检测,S和N蛋白表达正确;利用已建立的血清学检测方法分析100份正常成人血清,其中HCoV-HKU1S抗体的阳性率为47%,N抗体的阳性率为48%,S抗体和N抗体均阳性的占总数的21%,双抗体均阴性的占总数的22%。S抗体和N抗体共同检测可获得74%的阳性检出率。结论所建立的方法可用于HCoV-HKU1血清学分析,共同检测HCoV-HKU1S抗体和N抗体可获得较好的检测结果。在正常成年中HCoV-HKU1抗体阳性检出率较高。

  • 单位
    中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所