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摘要
目的 探讨miR-124调节Wnt/β-catenin信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 2019年7月至2021年6月收集接受胶质瘤切除手术和颅内减压手术患者的胶质瘤组织(胶质瘤组)和正常脑组织(正常对照组)各30例，另购买的体外培养人脑胶质瘤细胞株U251、U87MG、LN229、A172以及正常人脑星形胶质细胞(NHA)，用qRT-PCR法检测miR-124和WNT2B相对表达量。利用脂质体2000转染试剂盒对U251细胞进行转染并分组：对照组、miR-NC组、miR-124 mimics组、miR-124 mimics+pcDNA组、miR-124 mimics+pc-WNT2B组。用CCK-8法检测各组U251细胞增殖能力；Transwell法测定各组U251细胞侵袭能力；流式细胞仪检测各组U251细胞凋亡；Western blot法检测各组U251细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、β-连环蛋白(β-catenin)、C-myc蛋白水平；双荧光素酶报告实验检测miR-124与WNT2B的作用关系。结果 miR-124在胶质瘤组肿瘤组织和各细胞系中表达降低，WNT2B表达升高(P<0.05)，选择miR-124相对表达量最低的U251细胞进行转染实验。miR-124过表达后，U251细胞A值(48 h和72 h)、侵袭细胞数、cyclin D1、MMP-2、β-catenin、C-myc蛋白水平均显著降低(均P<0.05)，凋亡率及caspase-3蛋白水平升高(均P<0.05)。miR-124靶向下调WNT2B表达；上调WNT2B可激活Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达，并逆转过表达miR-124对U251细胞发挥的上述作用(P<0.05)。结论 miR-124可能通过靶向下调WNT2B抑制Wnt/β-catenin信号通路，进而抑制脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭并促进凋亡。
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单位汉中市中心医院
