沉默SOX4抑制骨肉瘤细胞的生长和转移

作者：傅蔷; 史纪元^*; 赵婷; 查鹭婷; 刘安生

来源：山西医科大学学报, 2020, 51(05): 388-396.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2020.05.006

• SOX4
• 骨肉瘤
• 肿瘤转移
• 细胞凋亡
• 异种移植肿瘤模型

目的探讨性别决定区Y框蛋白4(SOX4)对骨肉瘤细胞生长和转移的调控作用。方法采用免疫组化法检测西安市儿童医院血液肿瘤科30例骨肉瘤患者的骨肉瘤组织样本中SOX4的表达水平,并分析SOX4与患者临床参数的关系。通过RT-PCR和Western blot检测人骨肉瘤细胞系Saos-2和人成骨细胞h FOB 1. 19中SOX4 mRNA或蛋白表达。将携带SOX4-shRNA(SOX4-shRNA组)或阴性对照shRNA(NC-shRNA组)的p GFP-V-RS病毒载体转染Saos-2,RT-PCR和Western blot检测SOX4、Bax、P53、Bcl-2、MMP-2、MMP-9和Fibronectin 1 mRNA或蛋白表达; CCK-8法检测细胞增殖; AnnexinⅤ和碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞凋亡;伤口愈合实验和基质胶侵袭实验评价细胞迁移和侵袭能力。将SOX4-shRNA(SOX4-shRNA组)或NC-shRNA(NC-shRNA组)转染的Saos-2细胞接种到BALB/c裸鼠背部建立异种移植肿瘤模型,考察SOX4在体内对肿瘤生长的影响。结果 SOX4在骨肉瘤组织中高表达,与TNM分期和远处转移有关(P <0. 05),与年龄、性别和肿瘤大小无明显相关性(P> 0. 05)。Saos-2细胞中SOX4 mRNA和蛋白表达水平显著高于h FOB 1. 19细胞(均P <0. 001)。与NC-shRNA组相比,SOX4-shRNA组在培养48 h和72 h时细胞增殖能力显著降低(P=0. 004和P=0. 002)。与NC-shRNA组相比,SOX4-shRNA组细胞凋亡率明显增加(P <0. 001),细胞中Bax和P53的蛋白表达水平显著升高(均P <0. 001),而Bcl-2的蛋白表达水平显著降低(P <0. 001)。与NC-shRNA组相比,SOX4-shRNA组细胞的伤口面积明显升高(P=0. 009),而细胞侵袭数明显降低(P <0. 001),并且MMP2、MMP9和Fibronectin 1蛋白表达显著降低(均P <0. 001)。与NC-shRNA组相比,SOX4-shRNA组小鼠的肿瘤体积在生长21 d和28 d时显著降低(P=0. 012和P <0. 001)。结论 SOX4在骨肉瘤患者中异常高表达,并且与不良预后有关。抑制SOX4的表达可抑制肿瘤细胞的增殖和转移能力,并诱导细胞凋亡。

• 单位
  陕西省人民医院; 西安市儿童医院