摘要

目的:探讨体外诱导小鼠骨髓细胞分化为肥大细胞的方案,用于肥大细胞功能调节药物研究。方法:从小鼠股骨取骨髓细胞,在干细胞因子(SCF)、白细胞介素-3(IL-3)或SCF和IL-3联合诱导下,体外培养4周。然后每周用倒置显微镜观察细胞生长情况,计数细胞数量;流式细胞仪分析培养体系中肥大细胞比例,并计算肥大细胞绝对数量;4周后通过测定β-己糖胺酶释放量及抑制剂的调节作用评估肥大细胞功能。结果:三种诱导方法均能促进肥大细胞体外分化,但是不同诱导条件获得的肥大细胞纯度和数量有较大差异。SCF单独诱导获得的肥大细胞纯度和数量最低;IL-3单独诱导获得较高的肥大细胞纯度和总数;SCF和IL-3联合诱导能够获得较高的肥大细胞纯度,同时能获得远高于两种因子单独诱导获得的肥大细胞数量;SCF和IL-3联合诱导4周获得的肥大细胞具有完整的功能。结论:利用SCF和IL-3联合诱导4周,能够获得大量高纯度且功能完整的肥大细胞,可以用于通过肥大细胞功能调节发挥抗过敏作用的药物药效和作用机制研究。