科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 利用自带Linker的引物，重组嗜肺军团菌pip和momp基因，构建其重组质粒pET-MLP，以获得其原核细胞表达产物并进行鉴定。方法 首先制备足量的pET-pip、pET-momp以及空质粒pET-32a（+）；通过PCR扩增pip、momp基因，将其定向克隆至pET-32a（+）并进行纯化筛选和鉴定；最后利用含有Linker的引物，将重组质粒pET-pip和pET-momp基因进行连接，完成pET-MLP的构建、筛选和鉴定。结果 利用PCR、限制性核酸酶切电泳进行结果鉴定，于NCBI中将重组质粒的核酸序列与LP1型军团菌的相应序列对比，结果表明其同源性达到98%。结论 实验成功构建、表达了重组质粒pET-MLP，为下一步以重组蛋白MLP作为诊断抗原进行嗜肺军团菌血清学检测奠定了基础。
- 单位
