液相色谱-电喷雾串联质谱分析人全血中环孢素的基质效应评估及其机理探究

作者：朱荣华; 李焕德^*; 蔡骅琳; 方平飞; 彭文兴

来源：中国医院药学杂志, 2020, 40(11): 1199-1205.

DOI：10.13286/j.1001-5213.2020.11.06

• 液相色谱-电喷雾串联质谱
• 环孢素
• 基质效应
• 血液
• 抗凝剂

目的:评估液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)分析人全血中环孢素的基质效应,并探究其发生机理。方法:全血裂解物的蛋白沉淀上清液用作全血基质。分别用乙腈水溶液和全血基质配制等浓度环孢素A(CyA)、环孢素C(CyC)的质控样品。分别在添加H+、NH+4和Na+的流动相中,用LC-ESI-MS/MS的MRM模式检测质控样品中CyA,CyC的[M+H]+、[M+NH4]+和[M+Na]+(M=CyA,CyC)峰面积,以其计算基质效应因子;用MS Scan模式检查质控样品中CyA、CyC色谱流出峰的质谱离子组成情况,用于判断基质效应原因。结果:在添加H+、NH+4和Na+的流动相中,全血基质中CyA、CyC基质效应因子分别为-76.6%～-54.0%、-86.0%～-55.3%和-42.8%～-34.1%。在加H+、加NH+4流动相中,标准液加全血基质的CyA、CyC色谱峰的质谱中出现丰度很高的[M+Na]+和[M+K]+,在加Na+流动相中它们出现丰度很高的[M+K]+,而对应的定量离子[M+H]+、[M+NH4]+或[M+Na]+的丰度显著降低。结论:全血基质对环孢素的LC-ESI-MS/MS分析产生明显的基质效应,其原因与基质中Na+、K+同添加在流动相中用于辅助电离的H+、NH+4或Na+竞争与环孢素加合,导致定量目标加合离子丰度显著降低有关。

• 单位
  中南大学湘雅二医院