摘要

以绿豆为原料提取钙调素(CaM),通过等电点沉淀、热变性纯化、PhenylSepharose CL-4B疏水层析法对其进行分离纯化。研究CaM对绿豆谷氨酸脱羧酶(GAD)酶活力的调节作用。结果表明:等电点沉淀和热变性法结合Phenyl-Sepharose CL-4B疏水性层析法可进行绿豆CaM的分离纯化并得到了纯度较高的CaM蛋白,经纯化后的绿豆CaM纯化倍数为504.12、酶的比活力达到32.31 U/mg、酶活力回收率为72.27%,RP-HPLC谱图显示为单一峰,表明纯化效果较好。CaM能显著提升绿豆GAD的相对酶活力,且Ca2+对绿豆GAD霉活力具有双向调节作用。