马氏珠母贝Ago2基因克隆与表达分析

作者：谢冰怡; 熊新威; 郑哲^*; 焦钰; 邓岳文; 杜晓东

来源：基因组学与应用生物学, 2020, 39(07): 2972-2979.

DOI：10.13417/j.gab.039.002972

• 马氏珠母贝
• Argonaute 2
• 基因克隆
• 表达分析

为探讨由Argonaute 2 (Ago2)介导的LncRNA-miRNA调控系统在贝类生物矿化(Biomineralization)的调控机制,本研究利用RACE技术克隆获得马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii) Ago2 (PmAgo2)基因cDNA全长序列并检测其表达。结果表明,PmAgo2全长3 465 bp,开放阅读框(open reading frame, ORF) 2 679 bp,编码892个氨基酸残基,5’UTR为113 bp,3’UTR为673 bp;预测其分子量为101.061 39 kD,理论等电点为9.48;多序列比对的结果表明,PmAgo2与脊椎动物和其他无脊椎的Ago2具有较高的保守性,与美洲牡蛎(Crassostrea virginica)的相似度高达88%;qRT-PCR结果显示,PmAgo2在马氏珠母贝各个组织均有表达,外套膜边缘膜区的表达量最高。利用脊椎动物Ago2抗体,通过Western blotting检测其在外套膜组织中的表达,发现Ago2蛋白的分子量在100 kD左右,与理论的分子量相一致。本研究结果为后期深入研究由Ago2介导的LncRNA-miRNA非编码RNA调控系统奠定基础。

• 单位
  广东海洋大学