重组色素上皮衍生因子对人视网膜微血管内皮细胞迁移及凋亡的影响

作者：李涛; 李加青; 罗燕; 马红婕; 丁小燕; 袁玲; 马伟; 胡旭颋; 万婷; 唐仕波

来源：中国病理生理杂志, 2010, (11): 2240-2245.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2010.11.031

• 腺相关病毒
• 转染
• 细胞迁移
• 细胞凋亡
• 流式细胞术 Adeno-associated virus
• Transfection
• Cell migration
• Apoptosis
• Flow cytometry

目的:构建rAAV2-PEDF腺相关病毒,研究色素上皮衍生因子(PEDF)基因高表达对人视网膜微血管内皮细胞的作用。方法:将PEDF基因克隆、重组到腺相关病毒载体pSNAV,得到的pSNAV-PEDF后转染BHK细胞,用含G418的培养基进行筛选,得到稳定转染pSNAV-PEDF的生产细胞系,用重组1型单纯疱疹病毒HSV1-rc/△ UL2感染细胞进行病毒包装,纯化后得到高滴度rAAV2-PEDF病毒颗粒。按照105v.g./cell的剂量进行rAAV2-PEDF病毒转染,分别设空白和阴性对照,激光共聚焦显微镜下观察GFP阳性细胞,Western blotting检测PEDF蛋白表达。Boyd...

• 单位
  眼科学国家重点实验室; 中山大学中山眼科中心