肝癌抗原肽(EPVTKAEML)与人HSP70融合基因的构建及原核表达

作者：曲萍; 马加海; 黄勇; 刘利兵; 铁茹; 刘芳娥; 黄小军

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2008, (02): 113-114+118.

• 肝肿瘤/免疫学
• 抗原
• 肿瘤/遗传学
• 表位
• 热休克蛋白类70/遗传学
• 基因表达 hepatoma/immunology
• antigen
• neoplasm/genetics
• epitope
• heat-shock protein 70/genetics
• gene expression

目的:构建及原核表达肝癌抗原肽(EPVTKAEML)与人热休克蛋白70(HSP70)的融合基因。方法:采用加端PCR方法,将EPVTKAEML的基因序列融合到人HSP70基因的3′端;将融合基因克隆入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)/EPVTKAEML-HSP70。经限制性内切酶BamHI、XhoI双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE检测表达结果。结果:应用加端PCR方法扩增出约2.0kb的目的片段,序列测定结果证实,EPVTKAEML的基因序列成功地融合到人HSP70基因的3′端。经Bam...

• 单位
  第四军医大学; 烟台毓璜顶医院