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摘要
为了研究牦牛DNA甲基化转移酶1(DNA Methyltransferase 1,DNMT1)基因，并比较其在牦牛、犏牛睾丸组织中的mRNA水平，试验以成年麦洼牦牛睾丸组织cDNA为模板，利用RT-PCR扩增DNMT1基因，通过连接、转化等过程克隆出牦牛DNMT1基因CDS序列；并对其编码的蛋白质进行生物信息学分析、蛋白质相互作用网络预测分析；采用实时荧光定量PCR方法检测在牦牛(n=10)、犏牛(n=10)睾丸组织中DNMT1 mRNA的相对表达量。结果表明：牦牛DNMT1基因CDS全长为4 836 bp,编码1 610个氨基酸；牦牛DNMT1基因CDS序列与多胃反刍动物的同源性较高(>96%)。牦牛DNMT1蛋白分子质量为182.7 ku,无跨膜结构，无信号肽，为带正电荷的亲水性非分泌蛋白；DNMT1蛋白的二级结构主要由无规则卷曲和α-螺旋构成；STRING相互作用网络显示其与DNMT3A、DNMT3B、组蛋白H3蛋白共表达；在犏牛睾丸组织中DNMT1 mRNA的表达极显著低于牦牛(P<0.01)。说明DNMT1基因可能会影响犏牛雄性不育。
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