circUCK2靶向miR-483-5p调控oxLDL诱导的血管内皮细胞氧化应激和细胞凋亡机制研究

作者：李平; 徐虹; 王文志; 范雷雷; 王涛

来源：河北医药, 2022, 44(06): 829-833.

• circUCK2
• miR-483-5p
• 血管内皮细胞
• 氧化应激
• 细胞凋亡

目的 探讨circUCK2对oxLDL诱导的血管内皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响及分子机制。方法 人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)分为对照(Con)组、氧化低密度脂蛋白(oxLDL)组、oxLDL+pcDNA组、oxLDL+pcDNA-circUCK2组、oxLDL+anti-miR-NC组、oxLDL+anti-miR-483-5p组、oxLDL+pcDNA-circUCK2+miR-NC组、oxLDL+pcDNA-circUCK2+miR-483-5p组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circUCK2和miR-483-5p的表达水平；试剂盒检测细胞丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达；双荧光素酶报告实验检测circUCK2和miR-483-5p的靶向关系。结果 oxLDL诱导的血管内皮细胞中circUCK2表达水平降低，miR-483-5p表达水平升高，MDA含量升高，SOD、GSH-Px活性降低，细胞凋亡率升高，Bcl-2蛋白表达水平降低，Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。过表达circUCK2或抑制miR-483-5p表达，oxLDL诱导的血管内皮细胞中MDA含量降低，SOD、GSH-Px活性升高，细胞凋亡率降低，Bcl-2蛋白表达水平升高，Bax蛋白表达水平降低(P<0.05)。StarBase预测发现circUCK2的序列中含有与miR-483-5p互补的核苷酸序列；WT-circUCK2与miR-483-5p共转染后的血管内皮细胞荧光素酶活性降低，而MUT-circUCK2与miR-483-5p共转染后的血管内皮细胞荧光素酶活性无显著变化(P>0.05)。过表达circUCK2后miR-483-5p表达水平降低；抑制circUCK2表达后miR-483-5p表达水平升高(P<0.05)。与oxLDL+anti-miR-NC组比较，oxLDL+anti-miR-483-5p组血管内皮细胞中miR-483-5p表达水平降低，MDA含量降低，SOD、GSH-Px活性升高，细胞凋亡率降低，Bcl-2蛋白表达水平升高，Bax蛋白表达水平降低(P<0.05)。与oxLDL+pcDNA-circUCK2+miR-NC组比较，oxLDL+pcDNA-circUCK2+miR-483-5p组血管内皮细胞中miR-483-5p表达水平升高，MDA含量升高，SOD、GSH-Px活性降低，细胞凋亡率升高，Bcl-2蛋白表达水平降低，Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 过表达circUCK2可通过靶向下调miR-483-5p抑制oxLDL诱导的血管内皮细胞氧化应激和细胞凋亡。