原花青素提高人舌癌细胞系放射敏感性及机制研究

作者：刘菲菲; 席照亮; 刘秋月

来源：安徽医药, 2022, 26(03): 443-447.

• 舌肿瘤
• 原花青素
• Tca8113(人舌鳞癌细胞)
• 放射敏感性
• 微小RNA-124
• 细胞凋亡

目的 探讨原花青素（grape seed proanthocyanidins,GSP）提高人舌癌细胞系放射敏感性及机制。方法 2019年3月至2020年2月，将对数期生长的人舌癌Tca8113细胞分为对照组（Tca CON）,Tca8113细胞加10 mg/L GSP组（Tca GSP-10 mg/L）、Tca8113细胞加20 mg/L GSP组（Tca GSP-20 mg/L）、Tca8113细胞照射组（Tca IR）、Tca8113细胞照射加10 mg/L GSP组（Tca IR+GSP-10 mg/L）、Tca8113细胞照射加20 mg/L GSP组（Tca IR+GSP-20 mg/L）。MTT法检测加入不同浓度GSP对舌癌细胞Tca8113增殖的影响；流式细胞术检测6 MV X线直线加速器照射后（6 Gy）GSP对Tca8113细胞凋亡的影响；实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）实验检测在加入不同浓度GSP作用下对照射后Tca8113细胞微小RNA(miR)-124表达的影响；蛋白质印迹法（Western blotting）检测加入不同浓度GSP作用下对照射后Tca8113细胞B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和胱天蛋白酶-9(caspase-9)蛋白水平的影响。结果 MTT法结果显示，Tca IR组、Tca IR+GSP-10 mg/L组及Tca IR+GSP-20 mg/L组Tca8113细胞存活率分别为（63.21±2.97）%、（41.19±4.33）%及（19.61±2.51）%,GSP加强了照射后对人舌癌Tca8113细胞的抑制，且随药物浓度的增大，抑制效果增强（F=126.30,P<0.001）；流式细胞术结果显示，Tca IR组、Tca IR+GSP-10 mg/L组及Tca IR+GSP-20 mg/L组Tca8113细胞凋亡率分别为（7.62±0.27）%、（9.61±0.42）%及（17.50±0.37）%,GSP显著提高了照射后Tca8113细胞的凋亡率（F=55.77,P=0.001）;qRT-PCR结果显示，Tca IR组、Tca IR+GSP-10 mg/L组及Tca IR+GSP-20 mg/L组Tca8113细胞miR-124的表达水平分别为（1.43±0.29）、（2.64±0.45）及（3.81±0.44），照射给药组（加10 mg/L GSP组、加20 mg/L GSP组）Tca8113细胞miR-124的表达有明显上调（F=26.54,P=0.001）；蛋白质印迹法结果显示，与单纯照射组[Bcl-2:(0.77±0.25),caspase-9:(1.97±0.33)]相比，照射给药组[10 mg/L GSP Bcl-2及caspase-9分别为（0.43±0.23）、（2.58±0.43）,20 mg/L GSP Bcl-2及caspase-9分别为（0.31±0.17）、（2.94±0.52）],Bcl-2表达明显下调（F=7.10,P=0.006），而caspase-9的表达明显上调（F=7.67,P=0.005）。结论 GSP可能通过上调miR-124的表达和增强细胞凋亡提高舌癌Tca8113细胞的放射敏感性。

• 单位
  首都医科大学附属北京友谊医院; 民航总医院