摘要
目的 探讨葛根素对缺氧诱导的大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞PC12细胞神经损伤及c-Jun氨基末端激酶(JNK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法 体外培养PC12细胞,50 ng/ml神经生长因子(NGF)诱导分化,对高分化的PC12细胞进行缺氧处理,再对缺氧诱导的PC12细胞进行不同浓度(0.1、1.0、10.0μmol/L)葛根素处理,将细胞分为对照组,缺氧组,0.1、1.0、10.0μmol/L葛根素组,葛根素+JNK通路激活剂茴香霉素(AC)组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞活力;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测各组PC12细胞活性氧(ROS)水平;试剂盒检测各组细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;Western印迹检测各组凋亡蛋白JNK/MAPK信号通路相关蛋白表达情况。结果 低分化PC12细胞多呈椭圆形,聚集成小团簇状;高分化PC12细胞长出类似神经元样突起,培养一段时间后,细胞体积增大突起增多增长,形成网络。与对照组比较,缺氧组PC12细胞活力、SOD水平显著降低,细胞凋亡率、细胞内ROS含量、MDA水平及蛋白p-JNK、caspase-3表达显著升高(P<0.05);与缺氧组比较,0.1、1.0、10.0μmol/L葛根素组PC12细胞活力、SOD水平显著升高,细胞凋亡率、细胞内ROS含量、MDA水平及蛋白p-JNK、caspase-3表达显著降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);与10.0μmol/L葛根素处理组比较,葛根素+AC组细胞活力、SOD水平显著降低,细胞凋亡率、细胞内ROS含量、MDA水平及蛋白p-JNK、caspase-3表达显著升高(P<0.05)。结论 葛根素能够保护缺氧诱导的PC12细胞神经损伤,可能与抑制JNK/MAPK通路的激活有关。
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单位南阳市中心医院