AKT抑制剂对结肠癌细胞生物活性及β-catenin信号的影响

作者：杜光红; 余雪莲; 陈韵; 张彤彤; 蔡玉婷^*

来源：中国老年学杂志, 2022, 42(12): 2978-2983.

• 结肠癌
• AKT抑制剂
• MK2206
• 细胞形态
• 存活率
• β连环素
• 丝氨酸/苏氨酸激酶

目的 分析丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)抑制剂对结肠癌细胞生物活性及β-catenin信号的影响。方法 取对数生长的5×103的SW480细胞，分别加入0.0、2.5、5.0、10.0μmol/L的MK2206干预24 h,采用显微镜观察SW480细胞形态；CCK-8检测存活率；克隆实验检测细胞克隆数目；采用Hoechst荧光染色检测凋亡率；分别采用Western印迹及聚合酶链反应(PCR)检测细胞中β-catenin、p-AKT蛋白及mRNA表达。结果 2.5、5.0、10.0μmol/L处理下的SW480细胞均与0.0μmol/L组相比差距较大(P<0.05),5.0μmol/L处理下的SW480存活率低于2.5μmol/L(P<0.05),10.0μmol/L处理下的SW480存活率最低，且具有时间剂量依赖性，2.5μmol/L组SW480细胞克隆数目显著低于0.0μmol/L组(t=3.080,P<0.05),5.0μmol/L组显著低于2.5μmol/L组(t=5.385,P<0.05),10.0μmol/L组显著低于5.0μmol/L组(t=13.96,P<0.05);2.5μmol/L组SW480细胞凋亡率显著高于0.0μmol/L组(t=13.220,P<0.05),5.0μmol/L细胞凋亡率显著高于2.5μmol/L组(t=6.029,P<0.05),10.0μmol/L组SW480细胞凋亡率显著高于5.0μmol/L组(t=8.402,P<0.05),2.5μmol/L组SW480细胞β-catenin和p-AKT蛋白水平显著低于0.0μmol/L组(tβ-catenin=3.184,tp-AKT=3.060,均P<0.05),5.0μmol/L组β-catenin和p-AKT蛋白水平显著低于2.5μmol/L组(tβ-catenin=3.275,tp-AKT=8.227,均P<0.05),10.0μmol/L组β-catenin和p-AKT蛋白水平显著低于5.0μmol/L组(tβ-catenin=5.039,tp-AKT=5.477,P<0.05),2.5μmol/L组SW480细胞β-catenin和AKT mRNA均显著低于0.0μmol/L组(tβ-catenin=4.756,tp-AKT=3.132,均P<0.05),5.0μmol/L组β-catenin和AKT mRNA显著低于2.5μmol/L组(tβ-catenin=8.227,tp-AKT=3.811,P<0.05),10.0μmol/L组β-catenin和AKT mRNA均显著低于5.0μmol/L组(tβ-catenin=9.959,tp-AKT=6.235,P<0.05)。结论 AKT抑制剂MK2206能够减少人结肠癌细胞株SW480生理活动，降低存活率，加快凋亡，能够显著抑制β-catenin、p-AKT活性，随着MK2206浓度增加而降低。

• 单位
  重庆医科大学; 四川省医学科学院; 四川省人民医院; 第一附属医院消化内科