灵芝孢子干预糖尿病大鼠睾丸组织线粒体自噬及细胞的凋亡

作者：薛晶文; 王芳芳; 张欣; 逄瑞丰; 王肖烨; 马小茹^*

来源：中国组织工程研究, 2024, 28(04): 562-568.

• 糖尿病
• 睾丸
• PTEN诱导激酶1
• E3泛素蛋白连接酶
• 自噬
• 灵芝孢子

背景：男性生殖障碍作为糖尿病的常见并发症近年来受到越来越多的关注。灵芝孢子具有降糖、抗氧化、抗炎等功效，但其对于糖尿病睾丸组织的调控机制尚未完全阐明。目的：探讨灵芝孢子对糖尿病大鼠睾丸组织PTEN诱导激酶1/E3泛素蛋白连接酶通路及细胞凋亡的影响。方法：采用随机数字表法将40只雄性SD大鼠分为正常组、高脂高糖组、糖尿病组、灵芝孢子干预组，每组10只：高脂高糖组、糖尿病组、灵芝孢子干预组给予高脂高糖饮食至实验结束；高脂高糖饮食1个月后，糖尿病组、灵芝孢子干预组腹腔注射链脲佐菌素30 mg/kg建立2型糖尿病模型；造模成功后，灵芝孢子干预组灌胃给予灵芝孢子300 mg/(kg·d)，其余3组灌胃给予等量生理盐水，持续给药12周。给药结束后，检测大鼠精子数量和形态、睾丸组织形态结构、血清睾酮和睾丸组织氧化应激水平，免疫组化分析PTEN诱导激酶1、E3泛素蛋白连接酶、抗核孔蛋白表达，Western blotting检测睾丸组织中PTEN诱导激酶1、E3泛素蛋白连接酶、抗核孔蛋白、程序性死亡受体1、微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ、caspase3、剪切caspase3的蛋白表达。结果与结论：(1)与正常组和高脂高糖组相比，糖尿病组大鼠精子数量减少(P <0.01)，精子畸形率增加(P <0.01)，血清睾酮浓度降低(P <0.01)；与糖尿病组相比，灵芝孢子干预组大鼠精子数量增加(P <0.05)，畸形率降低(P <0.01)，血清睾酮浓度升高(P <0.01)；(2)与正常组和高脂高糖组相比，糖尿病组大鼠睾丸组织中丙二醛水平升高(P <0.01)，谷胱甘肽还氧化物酶和超氧化物歧化酶水平降低(P <0.01)；与糖尿病组相比，灵芝孢子干预组大鼠睾丸组织中丙二醛水平降低(P <0.01)，谷胱甘肽还氧化物酶和超氧化物歧化酶水平升高(P <0.01)；(3)免疫组化染色显示，与正常组和高脂高糖组对比，糖尿病组大鼠睾丸组织中PTEN诱导激酶1、E3泛素蛋白连接酶阳性表达减少，抗核孔蛋白阳性表达增加；与糖尿病组相比，灵芝孢子干预组大鼠睾丸组织中PTEN诱导激酶1、E3泛素蛋白连接酶阳性表达增加，抗核孔蛋白阳性表达减少；(4)Western blotting检测显示，与正常组和高脂高糖组相比，糖尿病组PTEN诱导激酶1、E3泛素蛋白连接酶、程序性死亡受体1蛋白表达及微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ蛋白比值降低(P <0.05或P <0.01)，抗核孔蛋白、caspase3、剪切caspase3的蛋白表达升高(P <0.01)；与糖尿病组相比，灵芝孢子干预组PTEN诱导激酶1、E3泛素蛋白连接酶、程序性死亡受体1蛋白表达及微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ蛋白比值升高(P <0.05或P <0.01)，抗核孔蛋白、caspase3、剪切caspase3的蛋白表达降低(P <0.05或P <0.01)；(5)结果显示，灵芝孢子可能通过激活PTEN诱导激酶1/E3泛素蛋白连接酶信号通路增强睾丸组织自噬水平，减少组织细胞的凋亡，以此保护睾丸组织。

• 单位
  佳木斯大学; 基础医学院