ABCA8通过激活ERK信号通路促进人胰腺癌细胞的迁移和侵袭

作者：杨春梅; 袁慧; 张伟; 李进; 李梦鸽; 徐登飞; 屠红; 甘愉^*

来源：肿瘤, 2020, 40(02): 92-101.

• 胰腺肿瘤
• ATP结合盒式转运蛋白,亚家族A
• 细胞运动
• ERK信号通路
• 基质金属蛋白酶7

目的:探究ATP结合盒转运蛋白家族A亚家族成员8 (ATP-binding cassette transporter subfamily A member 8,ABCA8)对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响,以及可能的作用机制。方法:用携带有ABGA8基因的慢病毒GV358或空载体慢病毒(对照组)感染人胰腺癌CFPAC-1细胞,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测ABCA8 mRNA和蛋白的表达水平;细胞划痕愈合实验、Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测ABCA8过表达对CFPAC-1细胞迁移和侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测ABCA8过表达对细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及其磷酸化蛋白表达水平的影响。应用ERK抑制剂SCH772984阻断ERK信号通路,再行Transwell小室迁移和侵袭实验以检测ABCA8介导的促CFPAC-1细胞迁移和侵袭能力的变化;采用实时荧光定量PCR法检测ABCA8过表达对CFPAC-1细胞中基质金属蛋白酶2 (matrix metallopeptidase 2,MMP2)、MMP7、MMP9和金属蛋白酶组织抑制因子1 (tissue inhibitor of metalloproteinase1,TIMP1) mRNA表达水平的影响,以及SCH772984阻断ERK信号通路后对MMP7和TIMP1 mRNA表达水平的影响。结果:成功构建获得ABCA8稳定过表达的CFPAC-1细胞。ABCA8过表达能够明显促进CFPAC-1细胞的迁移(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05)。在ABCA8过表达CFPAC-1细胞中,ERK磷酸化蛋白的表达水平明显升高(P <0.01);ERK抑制剂SCH772984可以消除ABCA8对CFPAC-1细胞迁移和侵袭能力的影响(P值均>0.05)。同时,ABCA8过表达可以显著上调CFPAC-1细胞中MMP7 mRNA的表达水平(P<0.001),并下调TIMP1 mRNA的表达水平(P <0.01);ERK抑制剂可消除ABCA8介导的MMP7和TIMP1 mRNA的表达差异(P值均> 0.05)。结论:ABCA8能够通过ERK信号通路增强人胰腺癌细胞的迁移和侵袭能力,ABCA8介导的迁移和侵袭能力增强可能与上调MMP7和下调TIMP1的表达有关。

• 单位
  复旦大学; 上海市肿瘤研究所; 河南省人民医院; 癌基因与相关基因国家重点实验室; 上海交通大学医学院附属仁济医院