包装西尼罗假病毒稳定细胞株的建立

作者：卢星; 孙莹; 陈国江; 王晶; 乔春霞; 罗龙龙; 李新颖; 刘成华; 沈倍奋; 冯健男; 肖鹤^*

来源：军事医学, 2022, 46(10): 763-767.

• 西尼罗假病毒
• 病毒包装
• 稳定株
• 重组质粒
• BHK21细胞株

目的 为方便制备西尼罗假病毒，建立可包装西尼罗假病毒的稳定细胞系。方法 构建表达西尼罗病毒（WNV）结构蛋白C、prM和E蛋白的重组质粒pcDNA3.1-CME，转染BHK21细胞后，G418(1 mg/ml)加压筛选；利用流式细胞术、间接免疫荧光染色（IFA）以及Western印迹确证稳定细胞株中3种结构蛋白C、prM以及E蛋白的表达；利用103稀释的含海肾荧光素酶报告基因的WNV假病毒上清感染稳定细胞株，检测荧光素酶活性。结果与结论 所构建的稳定细胞株表达结构蛋白C、prM以及E蛋白；其被WNV假病毒感染后分泌的上清进一步感染BHK21细胞后，BHK21细胞产生荧光，证实该稳定细胞株能够包装出WNV假病毒。

• 单位
  内蒙古医科大学; 药物研究所