弓形虫新基因wx2黄色荧光蛋白标记质粒的构建与鉴定

作者：吴翔; 谭逵; 张琼; 谢荣华; 官剑武; 舒衡平

来源：中国现代医学杂志, 2008, (24): 3562-3565.

• 弓形虫
• 基因wx2
• 重组质粒

目的构建弓形虫新基因wx2黄色荧光蛋白标记的黄色荧光超表达质粒,为进一步研究弓形虫新基因WX2的功能提供工具。方法采用PCR扩增出编码wx2目的基因,用BglII,AvrII分别对PCR扩增产物和ptubYFP-YFP/sagCAT进行双酶切。将wx2定向克隆到tubYFP-YFP/sag-CAT;对重组质粒进行PCR,双酶切初步鉴定后做序列测定。结果特异扩增出预计wx2目的基因片段,大小为558bp;扩增产物成功连接到ptubYFP-YFP/sagCAT中,经PCR,双酶切及序列测定结果表明重组质粒中含有基因wx2读框。结论成功构建弓形虫新基因wx2黄色荧光超表达质粒wx2-tub-YFP sag/CAT。

• 单位
  中南大学湘雅医学院