敲低EYA3基因抑制人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的生长

作者：韩笑; 燕正强; 徐小洁; 李佳; 刘园园; 梁九思; 闫志风; 叶棋浓; 刘丹^*

来源：南开大学学报(自然科学版), 2019, 52(04): 107-112.

• EYA3 siRNA
• 细胞生长
• 稳定表达
• 筛选

为了探讨人眼缺失基因(EYA3)在人视网膜母细胞瘤发生发展中的生物学作用,构建了EYA3小干扰RNA (siRNA)的真核表达载体,并验证敲低效果和观察其对人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞生长的影响.根据人EYA3的cDNA序列,将设计含有小发卡结构的寡核苷酸序列克隆到siRNA表达载体上;将重组质粒转染HEK293T细胞中,通过实时定量RT-PCR及Western印迹检测EYA3基因的表达水平;重组质粒稳定转染人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞并利用生长曲线检测EYA3对其生长的影响.结果表明:构建的siRNA能够抑制EYA3基因的表达,生长曲线验证EYA3 siRNA基因能抑制人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的生长.最后结论是EYA3 siRNA能够抑制人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的生长,本实验为进一步研究EYA3在视网膜母细胞瘤中的功能奠定了基础.

• 单位
  锦州医科大学; 定西市中医院; 军事医学科学院