非小细胞肺癌ROS1及其融合基因CD74-ROS1逆转录病毒载体的构建

作者：杨阳; 郑智坤; 马骥; 杜成; 郭燕; 刘文超

来源：现代生物医学进展, 2015, 15(13): 2440-2442.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2015.13.011

• 逆转录病毒载体
• lNSCLClROS1l
• 融合基因

目的:利用逆转录病毒载体pBaba-puro构建携带ROS1基因及其CD74-ROS1融合基因的重组载体pBaba-puro-ROS1,pBaba-puro-CD74-ROS1。方法:设计与合成引物,提取组织标本RNA,反转录和PCR扩增,经BamHI和TaqI双酶切,琼脂糖凝胶电泳,切胶回收进行连接转化,并再次酶切鉴定,测序分析。结果:成功构建携带ROS1基因及其CD74-ROS1融合基因的重组载体pBaba-puro-ROS1,pBaba-puro-CD74-ROS1,并通过双酶切与测序鉴定。结论:利用逆转录病毒载体基因重组技术能够成功构建出携带相应基因的逆转录病毒,可用于后续研究。

• 单位
  第四军医大学; 西京医院