人颗粒溶素活性肽重组卡介苗的构建与表达

作者：张黎; 杨春; 何永林; 李娜; 徐蕾; 帖儒修

来源：重庆医学, 2010, (15): 1965-1967+1932.

• 颗粒溶素
• 重组卡介苗
• 真核表达 granulysin
• recombinant BCG
• eukaryotic expression

目的构建携带人颗粒溶素(GLS)活性肽的重组卡介苗(BCG),并鉴定该重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。方法以分子生物学方法 构建携带GLS活性肽基因和分支杆菌复制子OriM的真核穿梭共表达质粒pBMS,以电转化方式将pBMS质粒转入BCG构建重组BCG,抽提质粒进行PCR鉴定重组菌;将重组菌感染巨噬细胞,通过RT-PCR了解重组菌向真核细胞递呈质粒的能力。结果采用电转化方式可将pBMS导入BCG,抽提质粒鉴定出与GLS基因相符的目的条带。以该重组BCG感染小鼠巨噬细胞,96h后用RT-PCR法可扩增出相应的基因条带。结论成功构建含pBMS的重组BCG。该重组BCG能向小鼠巨噬细胞递呈携带基因...

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院