无血清悬浮培养MDCK-siat7e细胞的传代稳定性

作者：张生琰; 吴元元; 孙燕; 刘鹏; 孙振鹏; 王革; 李薇^*

来源：中国生物制品学杂志, 2021, 34(09): 1039-1043.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003420

• MDCK-siat7e细胞
• 无血清培养
• 传代稳定性
• 致瘤性

目的研究连续传代的犬肾上皮(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞MDCK-siat7e的传代稳定性。方法复苏工作细胞库,连续传45代,比较不同代次(0、7、17、28、45代)MDCK-siat7e细胞生长4 d的形态、0～9 d的生长曲线及比生长速率(μ)、葡萄糖比消耗率[Qi(Gluc)24 h]、乳酸比生成率[Qi(Lac)24 h]、氨比生成率[Qi(NH4+)24 h]。采用q RT-PCR法检测不同代次MDCK-siat7e细胞中siat7e基因的表达量。采用裸鼠体内接种法检测连续传代至第45代的MDCK-siat7e细胞的成瘤性;采用细胞裂解物裸鼠体内接种法和细胞DNA裸鼠体内接种法检测连续传代至第45代的MDCK-siat7e细胞的致瘤性。结果 5个不同代次的MDCK-siat7e细胞在培养4 d时均呈圆形,细胞边缘清晰,均匀分散于培养液中,无聚团现象,呈悬浮生长状态,生长状态良好。不同代次MDCK-siat7e细胞的μ、Qi(Gluc)24 h、Qi(Lac)24 h及Qi(NH4+)24 h差异均无统计学意义(P>0.05)。不同代次MDCK-siat7e细胞siat7e基因表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。连续传代至第45代的MDCK-siat7e细胞无明显的致瘤性。结论 MDCK-siat7e细胞连续传代至45代时,细胞形态基本保持一致,目的基因稳定,无致瘤性。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司